【重难点突破】
一、动物细胞培养
1、动物细胞培养
就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个的细胞,然后,在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
2、操作过程
(1)细胞来源是幼龄动物的组织、器官,其细胞的分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。
(2)将组织分散成单个细胞:物理方法—剪碎;化学方法是用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理。
(3)将分散的细胞和培养液组成细胞悬浮液,细胞生长时有接触抑制和贴壁生长现象。
(4)培养条件:
①无菌无毒环境:无菌——器具无菌处理,培养液加抗生素;无毒——定期更换培养液。
②营养:使用合成培养基时要加入血清、血浆等天然成分(含有促生长因子)
③温度和pH值:与被培养动物的体温相似,哺乳动物多数以36.5±0.5°C,多数pH为7.2~7.4。
④气体环境:95%氧气和5%二氧化碳。二氧化碳主要调节培养液的pH。