专题五 DNA和蛋白质技术
课题:血红蛋白的提取和分离
【课题目标】
本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法,并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。
【课题重点与难点】
重点:凝胶色谱法的原理和方法。
难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填及血红蛋白大分子的分离过程。
【导学诱思】
以下为血红蛋白的提取和分离的操作流程,针对该流程回答讨论相关问题
样品的处理(红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析)→凝胶色谱的操作(凝胶色谱柱制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入与洗脱(分离))→电泳提纯
一、样品的处理
1、本实验的血液样品应该选用鸡血还是猪血红细胞?为什么?
2、为了防止血液凝固,预先在采集的新鲜血样容器中加入什么物质?
3、为什么要对红细胞进行“洗涤”?怎样“洗涤”?“洗涤”结果达标的标准是什么?
在“洗涤”过程中为什么要使用“生理盐水”?用“蒸馏水”行吗?为什么?
4、可以采取什么方法使洗涤后的红细胞释放出血红蛋白?说说其中的原理。