【方法技巧】探究影响酶促反应的环境条件时需要注意下列事项:
①探究温度对酶活性的影响时,可以选用10 ℃作为温度梯度,设置的具体温度为10 ℃、20 ℃、30 ℃、40 ℃、50 ℃和60 ℃等,也可以根据酶的特点,尝试以5 ℃作为温度梯度。
②探究pH对酶活性的影响时,只须将温度梯度改成pH梯度,并选定一个适宜的温度进行水浴加热。反应液中的pH可以通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调节。
③探究酶的用量是建立在探究最适温度和pH对酶活性影响的基础之上的。此时,研究的变量是酶的用量,其他因素都应保持不变。实验时可以配制不同浓度的酶溶液,也可以只配制一种浓度的酶溶液,然后使用不同的体积即可。需要注意的是,反应液的pH必须相同,否则将影响实验结果的准确性。
④在混合反应物和酶之前,一定要让两者分别达到相应的条件。这样可以避免底物和酶在混合时条件变化,从而影响实验结果。
⑤将酶加入反应物后,应不时地用玻璃棒搅拌,使酶能更充分地催化反应。