题跟踪检测(十五)
1．(2021·福建厦门市·厦门双十中学高三其他模拟)Ti质粒上的T区即为T－DNA，虽然是在原核生物中产生的，但是当其整合到植物细胞核基因组后，也能进行转录和翻译。下图为用Ti质粒作为载体进行植物基因工程的部分步骤示意图。回答下列问题：
(1)图中①②过程需要用到的工具酶是__限制性核酸内切酶(或限制酶)、DNA连接酶__。③过程常用的方法是__Ca2＋处理法(或感受态细胞法或Ca2＋溶液处理法)__。
(2)pBR322质粒载体是研究最多、使用最早且应用最广泛的大肠杆菌质粒载体之一，作为高质量的载体，应具备的条件有__具有复制起点(或具有自我复制能力或能够自我复制)；具有标记基因；具有一个或多个限制酶的切割位点；对受体细胞无害；分子大小合适便于操作__(答2条)。
(3)图中的“植物基因”是目的基因，常用的扩增技术是__PCR(多聚酶链式反应)__，其原理是__DNA双链复制__。将该基因插入到T－DNA的非必需区域而不是其它区域的原因是__防止破坏T－DNA的转移(转移整合)特性和表达能力(转移、整合、表达(转录和翻译)__。
