1.(2011届·海淀抽检)如图是含某目的基因的DNA片段,据图回答下列问题。
(1)根据图示可知,若用 Eco和SmaI 限制酶切割,则此DNA片段可有 个限制酶切割位点,切割后共有 种 个切割末端。RI
(2)EcoRI限制酶切割后形成的末端是 末端,在图中用笔标出切割部位。
(3)如果EcoRI限制酶切割形成的目的基因片段要导入受体细胞,一般需要 作载体。其应具备的特点有 、 、 。
(4)E·coli DNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中 部位的化学键(填字母)。
(5)要获取需要的转基因生物最基本的操作步骤为 、 、 、 。
【解析】EcoRI、SmaI限制酶识别的序列均为6个核苷酸。EcoRI能识别GAATTC序列,切割后的为黏性末端-G AATTC-
-C TTAAG-;SmaI能识别CCCGGG序列,切割后的为平末端-CCC GGG-
-GGG CCC-。质粒是常用的载体,作为载体一般应具备以下几个特点,至少有一个切割位点,能自我复制,含标记基因等。连接酶是将两个核苷酸之间的磷酸二酯键连接起来。
【答案】(1)3 2 6(不计算原有的)
(2)黏性