1.(2019·浙江七彩阳光联考)某研究小组欲利用抗虫基因,通过农杆菌转化法培育抗虫玫瑰。图甲和图乙分别表示抗虫基因和农杆菌Ti质粒的限制性核酸内切酶的识别位点和抗生素抗性基因(PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸内切酶切割位点;ampr为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因)。
请回答下列问题:
(1)为获得大量抗虫基因,且保证形成重组质粒时,目的基因以唯一方向接入,可选用__________________(填限制酶的种类)分别切割目的基因和Ti质粒,再用DNA连接酶连接,形成重组DNA分子,再与经过________处理的________(A.有ampr和tet B.有ampr,无tet C.无ampr,有tet D.无ampr和tet)农杆菌液混合,使重组DNA进入农杆菌,再利用农杆菌将重组DNA转入培养的玫瑰细胞,使目的基因导入玫瑰细胞中。
(2)将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在__________上,进行液体悬浮培养,获得胚性细胞,进而培育成抗虫玫瑰。
(3)这种借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞,再通过将这些转基因细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株的技术就是_________________________________________。
答案 (1)SmaⅠ和PstⅠ CaCl2 D (2)摇床 (3)植物细胞工程技术
解析 (1)为获得大量抗虫基因,且保证形成重组质粒时,目的基因以唯一方向接入,可选用SmaⅠ和PstⅠ分别切割目的基因和Ti质粒,再用DNA连接酶连接,形成重组DNA分子,此时的重组DNA分子中的标记基因为ampr,再与经过CaCl2处理(使其成为感受态细胞)的无ampr和tet的农杆菌液混合,使重组DNA进入农杆菌,再利用农杆菌将重组DNA转入培养的玫瑰细胞,使目的基因导入玫瑰细胞中。(2)将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在摇床上,进行液体悬浮培养,获得胚性细胞,进而将其培育成抗虫玫瑰。(3)这种借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞,再通过将这些转基因细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株的技术就是植物细胞工程技术。