1.(2019广东广州调研)1985年Smith建立了噬菌体展示技术,科学家们利用这项技术,按照基因工程的原理,将控制抗体某片段合成的DNA序列插入噬菌体DNA的特定部位,使培养所得的噬菌体表面带有抗体片段,这些噬菌体既可以特异识别抗原,又能感染宿主菌进行再扩增。回答下列问题。
(1)实施这项技术,首先需从外周血、脾或淋巴结等部位分离出 (填“B”“T”或“体”)细胞,提取其总mRNA再经逆转录获得 。
(2)噬菌体DNA的某启动子和终止子之间有限制酶A和B的酶切位点,实施这项技术过程中需将相应DNA序列插入其中,而相应DNA序列中不含有上述两种酶的酶切位点,因此利用 技术扩增相应DNA序列时,需对两个引物的序列稍加修改,使扩增产物具有 ,从而有助于扩增所得的相应DNA序列与噬菌体DNA定向连接。
(3)经一定程序培养得到噬菌体后,可以利用 方法对其进行筛选,以获得表面带有特定抗体片段的噬菌体。
(4)对带有特定抗体片段的噬菌体进行克隆化培养时, (填“需要”或“不需要”)利用CaCl2处理细菌,理由是 。
