1．细胞培养的基本条件
（1）无毒、无菌的环境。
（2）基本的营养物质和生长因子：如葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸等。
（3）人体细胞培养的标准温度：（36.5±0.5）℃；大多数细胞的适宜pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%氧气，5%二氧化碳。
思考 动物细胞培养液中为什么要加入5%二氧化碳？
提示：维持培养液的pH。
2．细胞培养的过程
（1）基本过程：健康动物的组织
↓剪碎，用胰蛋白酶处理
单个细胞（分离细胞）
↓加培养液
制成细胞悬浮液
培养↓传代培养
细胞株
传代培养↓遗传物质改变
细胞系
①原代培养：将组织从健康动物体内取出，用浓度与活性适中的胰蛋白酶处理成单个细胞，然后用培养基配成一定浓度的细胞悬浮液，转入培养瓶培养的过程。
②传代培养：把原代培养的细胞定期用胰蛋白酶将它们从瓶壁上脱离下来，重新分散成细胞悬浮液，分装到多个培养瓶中继续培养的过程。
③细胞株：传代培养的细胞能传到10～50代，这种传代细胞叫做细胞株。
④细胞系：细胞株传至50代后有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，有可能在培养条件下无限地传下去，这种传代细胞叫做细胞系。
（2）特点：贴壁生长，接触抑制。
（3）冻存及复苏。
①冻存：长期保存细胞一般采用超低温冻存法。将细胞和保护剂放入－196℃的液氮中进行保存。
②复苏：将冻存的细胞放在37℃温水中解冻，细胞逐渐“苏醒”，再经过培养，细胞就能继续生长。
思考 动物细胞培养需要将组织分散成单细胞，所用的酶是什么？
提示：胰蛋白酶。
3．细胞培养的意义
（1）生产酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等生物制品。
（2）为皮肤大面积烧伤或烫伤病人培养出人工皮肤，供受伤者移植使用。
（3）进行有毒物质和药物的检测。
（4）在揭示细胞的全能性、细胞周期及调控，癌变机理与细胞衰老机理等基础研究中发挥了重大作用。
