1．(15分)(2019新余市期末)美国科学工作者Mirkov发现菠菜细胞中有一种毒蛋白能攻击很多细菌和真菌，欲培育产生毒蛋白抵抗柑橘青果病的柑橘新品种，其具体步骤如图所示：
(1)柑橘茎段芽的芽尖细胞通过MS培养基培养出愈伤组织的过程叫做______________________。
(2)利用某一时期菠菜体细胞内形成的mRNA通过逆转录过程形成互补DNA片段，与载体连接后储存在受体菌群中，这些受体菌群被称为菠菜的____________；要在短时间内大量扩增菠菜的毒蛋白基因可利用PCR技术，其原理是______________，该技术一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为________________三步。如果开始的毒蛋白基因只有一个，第n次循环需要引物____________对。
(3)重组的Ti质粒上除了菠菜的毒蛋白基因、标记基因外，还必需要有______________等。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用____________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。将含有重组Ti质粒的农杆菌与柑橘愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得导入成功的受体细胞，该筛选过程是通过在培养基2中加入____________实现的。
解析：本题考查基因工程中培育转基因生物的相关知识，分析基因工程的原理、PCR技术过程和植物组织培养的知识要点，再结合题意作答。
(1)柑橘的外植体通过MS培养基培养出愈伤组织的过程叫做脱分化。
(2)利用某一时期菠菜体细胞内形成的mRNA通过逆转录过程形成互补DNA片段，与载体连接后储存在受体菌群中，这些受体菌群被称为菠菜的cDNA文库；在最开始的变性之前常要进行一次预变性。PCR的一个循环要经历变性、复性和延伸三个步骤；第n次复制是从n－1次结束开始的，第n－1次结束后的基因有2n－1个，每个基因复制1次需要1对引物，第n次复制需要2n－1对引物。
(3)重组表达载体通常包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等；将目的基因导入微生物细胞最常用的转化方法是用Ca2＋处理细胞，使细胞处于感受态；在培养基中加有潮霉素，可以筛选出具有潮霉素抗性的细胞，用以获得导入成功的受体细胞。
答案：(1)脱分化 (2)cDNA文库 DNA双链复制 变性、复性和延伸 2n－1 (3)启动子和终止子 Ca2＋ 潮霉素
