1．(2018·河北衡水中学十五模)请回答下列有关生物技术实践方面的问题：
(1)培养基配制的步骤为：计算→称量→________→________→倒平板；为统计样品中活菌的数目，在 37 ℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在________的平板进行计数。
(2)泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成________，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在__________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。
(3)腐乳制作的流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________左右。
(4)某同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25，0.1 mm3)，统计4个中格中的细菌数，计算出每个小格所含细菌的平均数为2个，则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103)________个。
(5)对于频繁使用的菌种可将试管放入________保藏。
答案 (1)溶化 灭菌 30～300 (2)亚硝胺 盐酸酸化 (3)12% (4)8×109 (5)4 ℃冰箱
解析 (1)培养基配制的步骤：按配方计算培养基中各种成分的用量→称量(一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮)→溶化(将称好的各种成分溶解在水中，如果是固体培养基，需要使用凝固剂，如琼脂等；溶化时，注意搅拌，防止糊底)→灭菌(高压蒸汽灭菌)→倒平板；选择菌落数在30～300的平板进行计数，是因为在这个范围内，各个菌落之间的营养竞争不是特别剧烈而不会对菌落的形成造成比较大的干扰，同时也能在数菌落过程中让人眼有效分辨出各个菌落。
(2)亚硝酸盐在特定条件下(适宜的pH、温度和一定的微生物作用)转变为亚硝胺。亚硝胺具有很强的致癌、致畸、致突变作用，对人体有害；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。
(3)在卤汤中加酒，作用有二：其一是抑制微生物生长；其二是调味。但要求控制好量，一般要控制在12%左右。
(4)血细胞计数板计数(规格为16×25,0.1 mm3)，每个小格所含细菌的平均数为2个，稀释倍数为103，则每毫升样品中的细菌数＝2÷0.1×1000×16×25×103＝8×109个。
(5)为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，将已长成菌落的试管放入4 ℃冰箱中保藏。
