1．(2018·安徽芜湖高三5月模拟)科研工作者欲将某抗盐基因导入原生质体培育抗盐大豆。请回答下列问题：
(1)为获得大量抗盐基因，可通过________技术进行扩增，该技术需要2种引物的原因是________________________。
(2)导入抗盐基因的叶肉细胞原生质体应放在________(填“高渗”“等渗”或“低渗”)溶液中。原生质体需再生出________，经脱分化获得________，再分化获得抗盐植株，该过程的原理是________________。
(3)利用带有标记的抗盐基因探针与______________进行分子杂交，检测抗盐基因在受体细胞中是否转录。个体水平上的检测抗盐基因是否成功表达的方法是________________________。
答案 (1)PCR DNA双链反向平行，复制时两条链均为模板
(2)等渗 细胞壁 愈伤组织 植物细胞的全能性
(3)从转基因植株提取的RNA 浇灌一定浓度的盐溶液(或移栽到高盐环境中进行实验)
解析 (1)扩增目的基因，可采用PCR技术。由于DNA双链反向平行，复制时两条链均为模板，因此PCR技术中需要两种引物。
(2)由于原生质体无细胞壁，将其放入高渗溶液中会失水，低渗溶液中会吸水涨破，因此导入抗盐基因的叶肉细胞原生质体应放在等渗溶液中。将原生质体培养成植株，需要再生出新的细胞壁，然后脱分化获得愈伤组织，再分化才能获得抗盐植株。脱分化、再分化的过程称为植物组织培养，其原理是植物细胞的全能性。
(3)检测抗盐基因是否转录，采用分子杂交技术，即利用带有标记的抗盐基因探针与从转基因植株提取的RNA进行分子杂交，如能形成杂交带，则说明抗盐基因在受体细胞中已转录。个体水平上检测抗盐基因是否成功表达，需要在个体水平上检测其是否能抗高盐环境，即给该个体浇灌一定浓度的盐溶液或移栽到高盐环境中进行实验，观察它的生长情况。
