1．相关技能、技术和方法
(1)无菌操作的技能——灭菌
①分类：实验室常用高温处理达到灭菌效果，包括干热灭菌和湿热灭菌。
②作用：微生物分离和培养的基础。
③关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)配制培养基
①培养基概念：
为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养物质。
②分类：按化学性质的不同分为天然培养基和合成培养基。
(3)接种微生物
①接种：指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
②接种方法和常用工具(连线)
接种方法 常用工具
Ⅰ.涂布平板接种 a．接种针
Ⅱ.穿刺接种 b．接种环
Ⅲ.斜面接种 c．玻璃涂布器
Ⅳ.平板划线接种
答案：Ⅰ－c Ⅱ－a Ⅲ－b Ⅳ－b
2．大肠杆菌的接种与分离培养
(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基
其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。
(2)斜面接种和培养大肠杆菌
①主要目的：菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。
②主要步骤：准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌种→划线接种→在37_℃恒温箱中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 ℃)保存。
(3)平板划线分离和培养大肠杆菌
①平板的作用：培养、分离细菌等微生物。
②平板划线法是指用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。
