1.(2009•广东,38)根据学过的知识回答下列问题:
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生__________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可用植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间______________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:
发酵液―→离心―→含酶的发酵液―→透析―→粗提物Ⅱ―→纯化―→纯酶
↓ ↓
菌体去除 透析液(Ⅰ)去除
Ⅰ中的主要成分为____________;Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(3)为建设基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是________。
(4)除植酸酶外,微生物还应用在________________________的生产中。
答案 (1)透明圈 植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量) (2)小分子杂质
凝胶色谱法,根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化。
电泳法,根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。
(3)变性,复性,延伸 加热
(4)蛋白酶,脂肪酶,纤维素酶
解析 本题考查对微生物的分离和培养,蛋白质的纯化,酶活性鉴定等知识,结合实际应用。