知识自主梳理
一、基因工程的概念及基本工具
1.基因工程概念
2.DNA重组技术的基本工具
(1)限制性核酸内切酶(简称:限制酶)
①来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用:识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
③结果:产生黏性末端或平末端。
例:如下图所示,EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是—GAATTC—,切割位点在G和A之间;SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是—CCCGGG—,切割位点在C和G之间;说明限制酶具有特异性。
④本质:蛋白质。
[深入思考] 限制酶为何不切割自身DNA?
提示 限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别一种特定的碱基序列,并在特定的位点上进行切割;限制酶不切割自身DNA的原因是自身DNA中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。