1.相关技能、技术和方法
(1)无菌操作的技能
①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在干热灭菌箱内,在160~170℃下加热1~2h以达到灭菌的目的。
②湿热灭菌法常采用高压蒸汽灭菌锅进行,其使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。
(2)培养基的配制
①培养基的概念:是为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
②营养组成:一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外,根据拟培养的微生物的不同需要,有时还要加入维生素等特殊的营养物质,并要调节培养基的pH使之满足微生物生长的需要。
③种类:天然培养基和合成培养基,前者的主要优点是取材便利、营养丰富、配制简便,缺点是营养成分难以控制、实验结果的重复性较差;后者的优点是化学成分及其含量明确,实验的可重复性好,缺点是配制繁琐、成本较高。
(3)微生物的接种
①接种:是指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
②常用的工具有玻璃涂布器、接种针、接种环等,在涂布平板接种时要用玻璃涂布器,穿刺接种时要用接种针,在斜面接种或在固体培养基平板上进行划线接种时要用接种环。