1.基因工程操作中用到的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。
2.限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割。
3.质粒是常用的载体,它是一种小型的环状DNA分子,具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。
4.基因工程的基本操作程序:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
5.基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
6.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,导入动物细胞常用显微注射法,导入微生物细胞常用感受态细胞法。
7.检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因常用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否进行了转录同样是采用分子杂交技术,检测目的基因是否翻译成蛋白质常用抗原—抗体杂交技术。
8.蛋白质工程的操作过程:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。
9.植物组织培养的基本过程: