1．[2018·河北武邑高三质检]为解决塑料袋造成的“白色污染”问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解的目的菌，请根据有关知识回答下列问题：
(1)为培养该目的菌，需要配制出供其________所需的营养基质—培养基，对培养基灭菌常用的方法是________。在接种前需要检验使用的培养基灭菌是否合格，方法是________________________________________________________________________。
(2)为了确保能够从样品中分离得到所需要的微生物，我们可在接种之前进行__________培养，以增加目的菌的浓度。实验室常用的接种方法有__________和__________。
(3)该同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数分别为24、23、25，则每毫升样品中的菌落数是________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)。用该方法统计的数目往往比活菌的实际数目________。
【解析】 无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
(1)培养基可以为目的菌的生长繁殖提供营养物质，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，可以将未接种的培养基在37℃(或适宜温度)恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成。(2)为了确保能够从样品中分离得到所需要的微生物，在接种之前用以聚乙烯塑料为唯一碳源的选择培养基进行选择培养，以增加目的菌的浓度；实验室常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)根据题意可知，每克样品中的菌落数＝平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数＝(24＋23＋25)÷0.2×104＝1.2×106个；由于细菌会相互重叠，因此用该方法统计的数目往往比活菌的实际数目少。
【答案】 (1)生长繁殖 高压蒸汽灭菌法 将未接种的培养基在37℃(或适宜温度)恒温箱中倒置培养一段时间(或1—2天)，观察是否有菌落生成
(2)选择 平板划线法 稀释涂布平板法
(3)1.2×106 少
2．[2018·安徽滁州高三期末]科学家筛选培育良种纤维素分解菌对玉米芯进行降解，并进一步利用酵母菌发酵制备乙醇。回答下列问题：
(1)筛选纤维素分解菌时，一般在以______________为唯一碳源的培养基中添加________染料，通过是否产生______________来筛选纤维素分解菌。
(2)请用文字叙述图1中分解玉米芯丝菌用量与还原糖浓度的关系______________________________________________。
(3)图2表示酵母菌量与酒精产生量的关系，酵母菌接种量超过40mL后，酒精产量反而减少的原因是_________________________________________________。
为确定发酵罐内酵母菌的数量，常用稀释涂布平板法统计细菌数量，统计的数据往往会偏小的原因是___________________________________________________。
【解析】 据图分析，图1中，随着纤维素分解菌用量的增加，还原糖浓度先增加后降低，菌用量为30时还原糖浓度最大；图2中，随着酵母菌量的增加，酒精产率先增加后降低，酵母菌量为40时，酒精产率最高。
(1)纤维素分解菌具有分解纤维素的能力，因此其培养基中一般添加纤维素作为唯一碳源；刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法合成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(2)根据图1中的曲线变化分析，随着纤维素分解菌用量的增加，还原糖浓度先增加后降低，即在底物玉米芯用量一定的情况下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解为还原糖，当菌用量过大时，还原糖含量下降。(3)图2显示，酵母菌接种量超过40 mL后，酒精产量反而减少，其主要原因是酵母菌接种量过大导致酵母菌种群密度过大，不利于酵母菌的发酵活动。稀释涂布平板法统计细菌数量时，由于两个或多个细菌形成一个菌落，所以统计的数据往往会偏小。
【答案】 (1)纤维素 刚果红 透明圈
(2)在底物玉米芯用量一定的情况下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解为还原糖，当菌用量过大时，还原糖含量下降
(3)酵母菌接种量过大导致酵母菌种群密度过大，不利于酵母菌的发酵活动 两个或多个细菌形成一个菌落
