1.(16分)下图为利用生物技术获得转基因猪和转基因烟草的过程(图中数字表示过程或技术,字母表示物质或结构),据图回答下列问题。
(1)为分离提纯苏云金芽孢杆菌,先用 培养基进行扩大培养,再用 方法进行分离,获得一个个单独的 。
(2)在研究过程中,采用 技术对目的基因进行扩增,然后将目的基因与质粒等载体结合形成重组质粒。在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有 ___________________________________ 。
(3)图中②代表 技术。若培养C中的ES细胞,一般在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞,目的是 。
(4)若在0.5~0.6 mol/L的 溶液环境下用特定的酶处理D,可获得原生质体。若将含有D的培养物放在摇床上,通过 培养可以分散成单细胞,这些单细胞具有 细胞的特征。
答案(1)LB液体 划线分离(涂布分离) 菌落
(2)PCR(聚合酶链式反应) 限制性核酸内切酶和DNA连接酶
(3)胚胎体外培养 促进生长,抑制分化
(4)甘露醇 液体悬浮 胚性
解析(1)苏云金芽孢杆菌可用LB液体培养基进行扩大培养;分离微生物常用划线分离法或涂布分离法,这样可以获得单菌落。(2)PCR(聚合酶链式反应)技术可在体外大量扩增目的基因;构建基因表达载体时,首先需要用限制性核酸内切酶切割载体和含有目的基因的外源DNA分子,再用DNA连接酶将目的基因和载体连接形成重组质粒。(3)图中②代表胚胎体外培养技术。若培养C中的ES细胞,一般在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞,目的是促进生长,抑制分化。(4)在0.5~0.6 mol/L的甘露醇溶液环境下用特定的酶(纤维素酶和果胶酶)处理D,可获得原生质体。将含有D的培养物放在摇床上,通过液体悬浮培养可以分散成单细胞,这些单细胞具有胚性细胞的特征。
2.(14分)回答下列关于动物的克隆问题。
(1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是 ,人—鼠细胞融合通常会丢失 的染色体,可以进行人类基因的定位。
(2)科学家将 生成细胞和瘤细胞进行杂交,形成杂交瘤细胞,对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养,形成单抗 ,就能长久地得到单一的单抗,单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是 。
(3)科学家从一个流产的雌性猕猴的胚胎中,取两个体细胞的核,并分别进行核移植,发育成双胞胎克隆猴,该双胞胎克隆猴相当于是 (填“同卵”或“异卵”)双生。克隆动物的成功说明了在胚胎发育和个体发育中,细胞质具有调控 发育的作用。
答案(1)细胞杂交 人 (2)抗体 细胞株 单抗识别抗原部位专一,而一般抗血清的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物 (3)同卵 细胞核
解析(1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是细胞杂交;人—鼠细胞融合通常会丢失人的染色体,可以进行人类基因的定位。
(2)科学家将抗体生成细胞和瘤细胞进行杂交,形成杂交瘤细胞;对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养,可形成单抗细胞株,就能长久地得到单一的单抗,单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是单抗识别抗原部位专一,而一般抗血清的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物。
(3)用于核移植的两个细胞核都来自同一个流产的胚胎,即来自同一个受精卵有丝分裂产生的子细胞,所以该双胞胎克隆猴相当于同卵双生;克隆动物的成功说明了在胚胎发育和个体发育中,细胞质具有调控细胞核发育的作用。
