【高考目标定位】
1、蛋白质的提取和分离
2、PCR技术的基本操作和应用
【考纲知识梳理】
一、DNA的粗提取与鉴定
1、实验原理:DNA与杂质的溶解度不同,在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14mol/l的NaCl溶液中溶解度最低。
2、实验设计:
①实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。
②破碎细胞:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
③去除滤液中的杂质:利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,控制NaCl溶液的浓度去除杂质。
④DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。