胚胎工程和生态工程
1．人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
(1)htPA基因与载体用____________________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________________技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其____________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是____________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行____________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的____________。
(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到____________，说明目的基因成功表达。
解析：(1)用同种限制酶切割质粒和含有htPA基因的DNA片段可产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体；通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。(2)为获得更多的卵母细胞，通常对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵；采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。(3)通常用显微注射法将重组表达载体导入动物的受精卵；为了获得母羊，移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；早期胚胎细胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。(4)htPA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物，若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物，说明目的基因成功表达。
答案：(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交(或核酸探针)
(2)超数排卵 获能(处理)
(3)显微注射法 性别鉴定 全能性
(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)
