基因工程与细胞工程
1.(2015·江苏两市一模)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如图一所示。则用____________和________酶处理两个基因后,可得到_____端与_____端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入图二所示Ti质粒的TDNA中,构建____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是______________________________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过________________技术,可培育成转基因油菜植株。
(4)用____________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。