第2节 基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:________________、__________________、______________________、____________________。
目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定
一、目的基因的获取
1.从基因文库中获取目的基因:将含有某种生物________的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的________,称为基因文库。基因文库可大可小,如果它含了一种生物所有的基因,就叫____________;如果它只包含一种生物的一部分基因,就叫__________,如________。
2.利用PCR技术扩增目的基因:PCR技术是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。
(1)原理:利用________原理,将基因的核苷酸序列不断加以复制,使其呈指数方式增加。指数扩增约为2n(n为扩增循环的次数)。
(2)条件:已知目的基因的________序列、________、________、______________。
(3)过程:目的基因DNA受热变性后解链为____________________,与引物结合,然后在______________的作用下进行延伸形成DNA。
3.化学合成目的基因:如果________比较小,核苷酸序列又________,也可以利用DNA合成仪化学合成。
1.不同基因 不同基因 基因组文库 部分基因文库 cDNA文库
2.复制 (1)DNA复制 (2)核苷酸 引物 模板DNA Taq DNA聚合酶 (3)单链 Taq DNA聚合酶
3.基因 已知